🔬 ساختار کلی فیلتر فلورسنت در میکروسکوپ:
هر فیلتر فلورسنت شامل سه بخش است:
فیلتر
| Excitation Filter (فیلتر تحریک) | فقط طول موجهای خاصی را عبور میدهد تا رنگ فلورسنت تحریک شود. |
| Dichroic Mirror (آینه دو رنگی) | نور ورودی را به نمونه میتاباند و فقط نور گسیلشده (Emission) را به چشم یا دوربین منتقل میکند. |
| Emission Filter (فیلتر بازتاب / دید) | فقط نور منتشر شده از فلوروفور را عبور میدهد و بقیه نورها را حذف میکند تا تصویر تمیز و واضح دیده شود. |
🎨 معرفی فیلترهای رایج و کاربرد آنها
نام فلوروفور / فیلتررنگ قابل مشاهدهطول موج تحریک (Ex)طول موج گسیل (Em)کاربرد رایج
| DAPI | آبی (Blue) | ~ 358 nm | ~ 461 nm | رنگآمیزی DNA / هسته سلول |
| FITC | سبز (Green) | ~ 490 nm | ~ 520 nm | آنتیبادی فلورسنت، مارکر پروتئین |
| Texas Red / TRITC | قرمز (Red) | ~ 595 nm | ~ 615 nm | مارکر سیتوپلاسم / پروتئین |
| Aqua / Hoechst Aqua | آبی روشن مایل به فیروزهای | متفاوت بسته به برند | رنگآمیزی هسته یا DNA در کانال مجزا | |
| Cy5 (اختیاری) | مادون قرمز (Far-red) | ~ 650 nm | ~ 670 nm | Multi-staining پیشرفته |
🎯 نکته کاربردی در میکروسکوپهای فلورسنت
- هر کانال فیلتر در میکروسکوپ یک کلید یا اسلایدر جداگانه دارد.
- هنگام کار با DAPI باید اتاق تاریک باشد و نور فرابنفش (UV) فعال شود.
- FITC نیاز به نور آبی (Blue light source) دارد.
- Texas Red/TRITC از نور سبز-زرد تحریک میشود.
- اگر چند رنگ همزمان استفاده شود (Multi-channel Imaging)، ترتیب مناسب مشاهده باید رعایت شود تا تصویر Overlap نشود.
دیدگاه خود را بنویسید